使用分光光度計(jì)檢測(cè)中影響標(biāo)準(zhǔn)曲線質(zhì)量的幾個(gè)因素!
溶液濃度變化
溶質(zhì)隨溶液濃度變化而出現(xiàn)電離、解離或聚合的程度,或與顯色劑生成有色物的配位數(shù)發(fā)生改變,會(huì)使光度法測(cè)定不符合比耳定律。
單色光純度不夠
光度法中要求在*大吸收峰處測(cè)定吸光度,因此要求光度計(jì)的有效譜帶寬度越窄越好,有利于獲得純度高的單色光。當(dāng)單色光純度不夠,即有效譜帶寬度不夠窄時(shí),測(cè)定的吸光度偏低,濃度越高,測(cè)得的吸光度偏低越多,致使標(biāo)準(zhǔn)曲線上端向下彎曲。
比色皿的厚度或光學(xué)性能不一致
如果裝試劑空白液的比色皿較其它比色皿薄或?qū)獾奈蘸头瓷渖僖恍?,則曲線的延線與縱坐標(biāo)相交;反之,與橫坐標(biāo)相交。因?yàn)楦鳒y(cè)點(diǎn)i:=Ai-A0,當(dāng)裝空白液的比色皿較薄時(shí),A0值偏低,Yi=Ai-A0值偏高,反之,Yi值偏低。
顯色反應(yīng)和反應(yīng)條件的問(wèn)題
當(dāng)顯色反應(yīng)的靈敏度不高時(shí),被測(cè)物低于某一濃度就不能顯色,當(dāng)濃度不同時(shí),溶液對(duì)光的吸收、散射的程度不同,低濃度段往往彎曲,加上濃度高時(shí)部分膠體顆粒的聚沉,致使測(cè)定的吸光度降低,曲線上端向下彎曲。
操作上的原干擾物質(zhì)的影響
例如褪色反應(yīng),顯色溶液的顏色不穩(wěn)定,易褪色,若比色時(shí)間超過(guò)了穩(wěn)定時(shí)間,標(biāo)準(zhǔn)系列中高濃度溶液顏色減褪,致使曲線上端向下彎曲。因此應(yīng)控制好顯色劑的加入時(shí)間,可以每加3份,停3~3min,再加上3份,依次進(jìn)行,以使每支比色管的顯色時(shí)間相近。
